郭俊廷 高濃度胺基酸下氨之定量方法的建立

    本實驗採用螢光衍生方法測量氨濃度，利用鄰苯二甲醛(o-phthaldialdehyde)搭配亞硫酸鈉(Na₂SO₃)在鹼性環境中會和氨形成螢光衍生物，且在波長364 nm激發光下會放出波長425 nm發射光，由發射光的量測即可定量水體中的氨含量；在OPA標準液與氨樣品1:1混合的情況下，以10 mM OPA 、0.32 mM Na₂SO₃、0.32 M硼酸緩衝液 (以上濃度在與氨標準品混合後即稀釋一倍) ，pH=10，衍生溫度60℃，持續衡溫150秒，再於室溫靜置5分鐘，可得最佳的衍生效果，在純水中可得偵測極限（MDL）0.035 μM。

相對於高鹽度基質影響不大，胺基酸仍有嚴重的干擾的情況下，本實驗室搭配高效能液相層析儀及『後衍生器』（post- derivalizator）進行胺基酸與氨的分離與分析；在高濃度胺基酸基質系統下，以陽離子交換管柱進行胺基酸與氨之分離，再以『後衍生螢光法』偵測氨，方能排除胺基酸的干擾。進一步經由實驗結果發現，在含有高濃度胺基酸、銅離子、氯化鈉、磷酸根離子的模擬海水樣品，氨檢量線仍有非常好的線性關係(0.1~5μM)，MDL為0.071 μM。