雲臺 價銅對高效液相層析搭2,4-硝基苯肼管柱前衍生系統分析脂肪醛的影響與探討


    利用2,4-二硝基苯肼(2,4-dinitrophenylhydrazine, DNPH)做為量測醛類的衍生試劑為最常見及廣泛應用的分析方法,通常在酸性催化衍生下以高效率液相層析儀 (high performance liquid chromatography, HPLC)搭配紫外光可見光偵測器(UV/Vis detector)量測在360 nmDNPH衍生物(hydrazone)的光譜吸收;我們藉由探討不同溫度下衍生反應的平衡常數,及衍生最佳pH值與DNPH質子化的關係對此衍生反應的機制有更進一步的了解,發現此衍生反應在室溫下有最高的反應平衡常數,DNPH質子化的平衡常數K1= 46.8 M-1。過去的研究發現二價銅(Cu(II))易與DNPH上的聯氨(Hydrazine)反應,進而造成分析方法的干擾,然而Cu(II)對此衍生反應的影響除了對DNPH造成分解外,Cu(II)與醛類的斐林反應(Fehling reaction)及Cu(II)對衍生物穩定性干擾,也都為影響此反應的因素,本篇研究目的為釐清Cu(II)對衍生反應造成的影響由何者所貢獻,並藉由加入EDTA(Ethylene dinitrilotrteaacetic acid) 做為Cu(II)的抑制劑,發現在加入適量的EDTA情況下可以有效降低Cu(II)對此反應的干擾。

 

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